Arbúsculo de Funneliformis geosporus, teñido con la técnica de Tinta y Vinagre.
Este hongo resulta bastante fácil de cultivar y multiplicar. Produce una abundancia de hifas en el polímero, así como numerosas esporas, tanto en el polímero como en la vermiculita. Es posible reiniciar sin dificultad una nueva generación a partir de granos de polímero que contengan esporas, y el establecimiento del cultivo ocurre rápidamente.
Suelen distinguirse tres tipos de esporas en el polímero: 1) esporas grandes de color amarillo, típicas de la especie; 2) esporas grandes de color blanco, cuya naturaleza permanece incierta —podría tratarse de esporas inmaduras o de una estructura distinta—; y 3) esporas pequeñas blanquecinas, a menudo parcialmente vacías, cuyo origen también queda por determinar. Un seguimiento fotográfico regular probablemente permitiría aclarar esta cuestión; se trata de una interesante línea de observación por explorar.
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- Resistencia 33 días en refrigeración
- Comparación entre fertilizante comercial 30-10-10 y M2P
- Microscopía
- Hongo aeróbico
- Notas sobre un cultivo de ocho meses
Resistencia 33 días en refrigeración
Tres plantas de Plantago lanceolata colonizadas por F. geosporus sobrevivieron a una estancia de treinta y tres (33) días en oscuridad dentro de un refrigerador a 4 °C.
Una ausencia prolongada del laboratorio, sin nadie que diera seguimiento a los cultivos, dio lugar a un experimento improvisado: tres (3) placas de Petri de P. lanceolata bien colonizadas por F. geosporus se colocaron en una bolsa de congelación Ziploc bien sellada, y luego se guardaron en el refrigerador. Se esperaba que las plantas murieran, con la intención de reutilizar las raíces colonizadas al regreso para reiniciar los cultivos. Estas tres plantas llevaban tres (3) meses en cultivo; la densidad de raíces en la placa era, por lo tanto, alta, y las plantas se encontraban en excelente condición. El hongo también era abundante en el polímero.
Contra todo pronóstico, las tres plantas sobrevivieron a esta estancia de 33 días y reanudaron su crecimiento tan pronto se colocaron de nuevo bajo la iluminación de cultivo (LED) habitual. El polímero viejo se retiró entonces y se reemplazó por polímero fresco, no colonizado, con el fin de verificar si el hongo seguía activo. Una observación realizada 46 días después de este reemplazo confirma que las tres plantas están sanas, con un follaje normal. El hongo recolonizó intensamente todo el polímero y produjo una abundancia de esporas nuevas: tanto la planta como el hongo se ven claramente en excelente estado.
Este resultado no deja lugar a dudas: las raíces o las esporas bastan para reiniciar una nueva generación. Aquí hay dos imágenes del nuevo polímero:
Comparación entre fertilizante comercial 30-10-10 y M2P
Se realizó un ensayo comparativo de desempeño entre un fertilizante comercial 30-10-10 y la solución M2P con F. geosporus y R. irregularis. Los detalles se describen en la página de experimentos diversos, disponible aquí. A continuación, la conclusión:
El crecimiento de las plantas fue muy rápido, y las placas irrigadas con 30-10-10 se secaron (demasiado) rápido, lo que parece haber perjudicado a F. geosporus, que se muestra menos “rápido” que R. irregularis para colonizar las raíces. En cuanto una raíz se coloniza, ambos hongos crecen rápidamente y resisten bien la sequía. Varias placas de F. geosporus mostraron un retraso notable en la colonización, probablemente debido a la sequía; una vez resuelta esta, la producción de hifas y esporas volvía a ser buena.
Las placas de F. geosporus habían sido inoculadas con granos de polímero colonizados, y este inóculo resultó eficaz.
Microscopía
Las esporas pequeñas blancas son difíciles de clasificar. Se observan muchas esporas pequeñas blancas y muchas esporas grandes de color naranja, pero pocas esporas intermedias. Las esporas pequeñas blancas suelen verse medio vacías o parcialmente transparentes: un buen tema para profundizar. Las hifas, por su parte, presentan la circulación bidireccional típica, fácil de observar.
La tinción mediante el método de Tinta y Vinagre funciona bien con este hongo: permite distinguir fácilmente las hifas, las vesículas y los arbúsculos.
Hongo aeróbico
F. geosporus parece presentar un comportamiento parcialmente aeróbico. La siguiente fotografía ilustra una placa de ocho (8) meses de edad: el hongo produjo ahí numerosas esporas en un entorno aireado, sobre y dentro de la vermiculita, así como en la superficie y el interior de los granos de polímero. La superficie de la vermiculita, dentro de la placa, constituye un microambiente húmedo, ya que la tapa permanece siempre colocada. Cabe señalar que algunas esporas, no mostradas aquí, se encuentran directamente sobre las raíces.
Cultivo a largo plazo: ocho meses
El cultivo de Funneliformis geosporus con la planta hospedera Plantago lanceolata puede prolongarse fácilmente durante ocho meses, y probablemente mucho más. Varias placas de P. lanceolata fueron inoculadas con granos de polímero colonizados en septiembre de 2025 para comparar distintos fertilizantes. Al final del experimento, algunas placas irrigadas con M2P simplemente se conservaron hasta mayo de 2026, es decir, unos ocho (8) meses. Las plantas siguen en muy buen estado, y en marzo de 2026, algunos granos colonizados permitieron iniciar con éxito nuevos cultivos.
En esta etapa, después de ocho meses de cultivo, la observación de las tres placas restantes permite destacar lo siguiente:
Hay esporas por todas partes en las placas (no ilustrado): se observan esporas del lado del polímero, dentro de los propios granos y sobre el fondo de plástico de la placa. Del lado de la vermiculita, se encuentran en la superficie y también alrededor de las raíces, al voltear la placa. Esto sugiere que la vermiculita probablemente también contiene un gran número de esporas, aunque no se realizó la extracción: los granos de polímero colonizados suelen ser suficientes para reiniciar cultivos.
La densidad de las hifas puede volverse muy intensa, casi “algodonosa”, dada la gran cantidad de hifas presentes en ciertas zonas de la placa, sobre todo cerca de la membrana divisoria. La densidad de las hifas no es homogénea: es alta cerca de la membrana divisoria y disminuye a medida que uno se aleja de ella.
Muchísimas hifas están vacías. La gran mayoría de ellas está vacía y, con frecuencia, sellada por una pequeña pared interna. Es necesario buscar bastante para encontrar una hifa todavía activa.
Algunas hifas se han vuelto muy gruesas. Las hifas más viejas son probablemente las más gruesas: nunca se ha observado una hifa así de engrosada en una placa joven, lo que sugiere que se van engrosando con el tiempo. Aquí, la hifa gruesa está vacía, pero también se han observado hifas gruesas con circulación muy activa.
No se observan vesículas. La observación directa al microscopio o con la lupa binocular no permite detectar vesículas ni arbúsculos en raíces vivas, a diferencia de R. irregularis, donde las vesículas suelen ser muy evidentes.
La densidad de contaminantes afecta muy poco las observaciones y tampoco parece perjudicar los cultivos. A gran aumento, es fácil observar bacterias móviles, así como protistas que probablemente se alimentan de ellas. El origen exacto de estos contaminantes se desconoce, pero están presentes prácticamente en todas partes, tanto en el aire como en los materiales.
También suele observarse una ligera presencia de algas microscópicas sobre la vermiculita, donde esta queda expuesta a la luz; sin embargo, estas algas no llegan al polímero.
Por lo general, no se conoce la identidad de los contaminantes, y existen potencialmente miles de especies contaminantes posibles. Sin duda existen contaminantes que podrían perjudicar los cultivos, pero, en general, y en apariencia, los cultivos resisten bien su presencia.